V8蛋白酶
2019/8/8 9:18:32
V8蛋白酶
EC：3.4.21.19
全名: 序列分析純V8蛋白酶；金黃色葡萄球菌V8蛋白酶
別名: V8蛋白酶；谷氨酰胺內(nèi)切酶；天冬酰胺內(nèi)切酶
儲(chǔ)存條件：凍干粉，2-8℃
來(lái)源：基因工程生產(chǎn)，大腸桿菌表達(dá)。
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介
V8蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶家族，能特異水解谷氨酸或天冬氨酸殘基羧基側(cè)肽鍵。在pH 7.8的NH4HCO3和pH 4.0的CH3COONH4緩沖液中識(shí)別并切割Glu羧基端肽鍵，在pH 7.8的磷酸鹽緩沖液中識(shí)別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵，且對(duì)Glu的水解速率高于Asp。V8蛋白酶在pH4.0-10.0之間均有活性，最適pH為8.0-8.5。在進(jìn)行蛋白質(zhì)酶切測(cè)序、肽圖譜分析和肽質(zhì)量指紋圖譜分析中使用時(shí)，可以單獨(dú)使用或與其他蛋白酶混合使用。V8蛋白酶的抑制劑有二異丙基氟磷酸（DFP）、α2- 巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-賴(lài)氨酸氯甲基酮（TLCK）。
2.產(chǎn)品特性
單位定義：在25℃，pH7.8的條件下，每分鐘催化底物（Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide）生成1μmol對(duì)硝基苯胺（4-nitroaniline）所需要的酶量為一個(gè)酶活性單位。
3.儲(chǔ)存和運(yùn)輸穩(wěn)定性
儲(chǔ)存穩(wěn)定性：重組V8蛋白酶凍干粉存于2-8℃，24個(gè)月穩(wěn)定；
溶解后穩(wěn)定性：用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于-20℃ 以下（1mg/ml），6個(gè)月穩(wěn)定；用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于4℃（1mg/ml，無(wú)菌），2個(gè)月穩(wěn)定；用50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于25℃或37℃（0.5mg/ml）12h，活性可維持85%以上；溶解后溶液可反復(fù)凍融10次無(wú)活性損失。
運(yùn)輸穩(wěn)定性：藍(lán)冰保溫運(yùn)輸，活性穩(wěn)定。
4.推薦使用方法
1）使用前注意
可按使用量分裝以最大限度避免污染或自切。
2）目的蛋白溶解
用酶切buffer溶解目的蛋白，例如25-50mM NH4HCO3 pH7.8，若溶解度不好對(duì)目的蛋白變性，添加尿素、SDS、DTT或加熱。尿素和SDS對(duì)V8蛋白酶的影響見(jiàn)表一。
3）酶切
V8蛋白酶和目的蛋白推薦比例為1/20-1/100（W/W)，25℃或37℃酶切2-18h。
表一：V8蛋白酶在含有不同濃度變性劑，尿素25℃2h，SDS25℃12h的穩(wěn)定性
（注：V8蛋白酶0.5mg/ml，50mM Tris-HCl pH8.0）
5.產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
序列分析純蛋白酶：特異性高，穩(wěn)定性好。
無(wú)動(dòng)物源性：重組生產(chǎn)，無(wú)外源性的病毒污染，生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料。
質(zhì)量穩(wěn)定：批量生產(chǎn)，可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)；產(chǎn) 品批次間無(wú)差異，質(zhì)量穩(wěn)定。
純度高：比活高；宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
凍干粉：易于儲(chǔ)存和運(yùn)輸。
符合法規(guī)要求：生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求，生產(chǎn)過(guò)程完全遵循NSF ISO 9001:2015質(zhì)量體系并符合GMP指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整：按客戶(hù)需求，可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。
6.相關(guān)產(chǎn)品
重組腸激酶；
序列分析純羧肽酶B；
序列分析純胰蛋白酶；
序列分析純糜蛋白酶。
EC：3.4.21.19
全名: 序列分析純V8蛋白酶；金黃色葡萄球菌V8蛋白酶
別名: V8蛋白酶；谷氨酰胺內(nèi)切酶；天冬酰胺內(nèi)切酶
儲(chǔ)存條件：凍干粉，2-8℃
來(lái)源：基因工程生產(chǎn)，大腸桿菌表達(dá)。
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介
V8蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶家族，能特異水解谷氨酸或天冬氨酸殘基羧基側(cè)肽鍵。在pH 7.8的NH4HCO3和pH 4.0的CH3COONH4緩沖液中識(shí)別并切割Glu羧基端肽鍵，在pH 7.8的磷酸鹽緩沖液中識(shí)別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵，且對(duì)Glu的水解速率高于Asp。V8蛋白酶在pH4.0-10.0之間均有活性，最適pH為8.0-8.5。在進(jìn)行蛋白質(zhì)酶切測(cè)序、肽圖譜分析和肽質(zhì)量指紋圖譜分析中使用時(shí)，可以單獨(dú)使用或與其他蛋白酶混合使用。V8蛋白酶的抑制劑有二異丙基氟磷酸（DFP）、α2- 巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-賴(lài)氨酸氯甲基酮（TLCK）。
2.產(chǎn)品特性
| 來(lái)源 | 重組大腸桿菌 |
| 產(chǎn)品外觀 | 白色、類(lèi)白色、類(lèi)黃色粉末 |
| 比活 | ≥ 5.0 U /mg pro. |
| 蛋白電泳 | 單一主條帶 |
| 分子量 | 24.0±2.4 kDa |
3.儲(chǔ)存和運(yùn)輸穩(wěn)定性
儲(chǔ)存穩(wěn)定性：重組V8蛋白酶凍干粉存于2-8℃，24個(gè)月穩(wěn)定；
溶解后穩(wěn)定性：用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于-20℃ 以下（1mg/ml），6個(gè)月穩(wěn)定；用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于4℃（1mg/ml，無(wú)菌），2個(gè)月穩(wěn)定；用50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于25℃或37℃（0.5mg/ml）12h，活性可維持85%以上；溶解后溶液可反復(fù)凍融10次無(wú)活性損失。
運(yùn)輸穩(wěn)定性：藍(lán)冰保溫運(yùn)輸，活性穩(wěn)定。
4.推薦使用方法
1）使用前注意
可按使用量分裝以最大限度避免污染或自切。
2）目的蛋白溶解
用酶切buffer溶解目的蛋白，例如25-50mM NH4HCO3 pH7.8，若溶解度不好對(duì)目的蛋白變性，添加尿素、SDS、DTT或加熱。尿素和SDS對(duì)V8蛋白酶的影響見(jiàn)表一。
3）酶切
V8蛋白酶和目的蛋白推薦比例為1/20-1/100（W/W)，25℃或37℃酶切2-18h。
表一：V8蛋白酶在含有不同濃度變性劑，尿素25℃2h，SDS25℃12h的穩(wěn)定性
（注：V8蛋白酶0.5mg/ml，50mM Tris-HCl pH8.0）
| 變性劑 | 濃度 | 殘余酶活 |
| 不添加 | 0 | 100% |
| 尿素 | 2M | 95% |
| 5M | 12% | |
| 8M | 0 | |
| SDS | 0.1% | 90% |
| 0.5% | 80% | |
| 1% | 50% |
5.產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
序列分析純蛋白酶：特異性高，穩(wěn)定性好。
無(wú)動(dòng)物源性：重組生產(chǎn)，無(wú)外源性的病毒污染，生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料。
質(zhì)量穩(wěn)定：批量生產(chǎn)，可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)；產(chǎn) 品批次間無(wú)差異，質(zhì)量穩(wěn)定。
純度高：比活高；宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
凍干粉：易于儲(chǔ)存和運(yùn)輸。
符合法規(guī)要求：生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求，生產(chǎn)過(guò)程完全遵循NSF ISO 9001:2015質(zhì)量體系并符合GMP指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整：按客戶(hù)需求，可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。
6.相關(guān)產(chǎn)品
重組腸激酶；
序列分析純羧肽酶B；
序列分析純胰蛋白酶；
序列分析純糜蛋白酶。
